化學(xué)發(fā)光顯色試劑盒是一種超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒，本產(chǎn)品與二抗上偶聯(lián)的辣根過氧化物酶(HRP)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)發(fā)出螢光，從而可以通過用X光片壓片或其它適當(dāng)化學(xué)發(fā)光成像設(shè)備檢測(cè)樣品。
HRP(40 kDa)已成為化學(xué)發(fā)光蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)的常規(guī)酶。其穩(wěn)定性和較小的分子量使其應(yīng)用逐漸普及，通過使每個(gè)IgG標(biāo)記更多的分子，可實(shí)現(xiàn)更高的檢測(cè)靈敏度。此外，HRP化學(xué)發(fā)光底物的改良和發(fā)展使其相較AP底物具有更高的蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)靈敏度。
用于辣根過氧化物酶(HRP)的化學(xué)發(fā)光底物多為雙組分系統(tǒng)，由穩(wěn)定的過氧化物溶液和增強(qiáng)型魯米諾溶液組成。
如果要制備工作液，需要將兩種組分混合在一起。當(dāng)與結(jié)合有HRP標(biāo)記抗體(或其他探針)的印跡一起孵育時(shí)，化學(xué)反應(yīng)生成的發(fā)射光可在425nm下，通過X光膠片、CCD成像系統(tǒng)和用于檢測(cè)化學(xué)發(fā)光的磷光成像儀進(jìn)行采集。發(fā)射光僅在酶-底物反應(yīng)期間發(fā)生;
因此，一旦酶周圍的底物耗盡，信號(hào)輸出將停止。雖然X-光膠片能夠提供定性和半定量的數(shù)據(jù)，并可以用來確認(rèn)靶蛋白的存在，但冷CCD成像裝置能夠提供定性分析、即時(shí)圖像處理，具有更高靈敏度、更高分辨率和比膠片更大的動(dòng)態(tài)范圍等優(yōu)點(diǎn)。
化學(xué)發(fā)光顯色試劑盒用于檢測(cè)直接或間接標(biāo)記辣根過氧化物酶(HRP)的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原。本試劑盒優(yōu)化了底物組成，使用了新型高效增強(qiáng)劑，發(fā)光強(qiáng)度比傳統(tǒng) ECL 顯色液提高了 50-100 倍，并有效地降低了背景。
試劑盒使用新的氧化劑代替不穩(wěn)定的雙氧水，提高了試劑盒的穩(wěn)定性。洗膜后用本產(chǎn)品配制的ECL工作液，室溫孵育膜數(shù)分鐘，將印跡膜用保鮮膜包被粘貼固定于X光片曝光暗盒。
然后轉(zhuǎn)入暗室將X光膠片壓在膜上曝光數(shù)秒到數(shù)小時(shí)，顯影定影后蛋白質(zhì)或核酸條帶可清晰顯示在X光膠片上。
本試劑采用了*的發(fā)光底物系統(tǒng)，化學(xué)發(fā)光顯色試劑盒盒是目前靈敏的商業(yè)化熒光ECL檢測(cè)試劑。