国产精品亲子乱子伦xxxx裸,亚洲韩精品一区二区三区,亚洲 春色 另类 小说,亚洲精品少妇久久久久久海角社区

歡迎光臨上海懋康生物科技有限公司
主頁 > 技術文章 > X-Gal平板制備的過程是怎樣的
技術文章
X-Gal平板制備的過程是怎樣的
   X-Gal也稱5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside或5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside,X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的顯色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下會產生藍色產物。X-Gal在β-半乳糖苷酶的催化下水解后呈藍色,因此常用于轉基因篩選試驗中,如藍白斑篩選或β-半乳糖苷酶的原位染色檢測實驗。藍白斑試驗中主要根據菌落呈現的顏色即可簡單的挑選出哪些是轉化子。

  X-Gal的使用方法

  首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液(-20℃避光保存),然后在100 ml的瓊脂培養(yǎng)基中,加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG(24 mg/ml)和100 μl的Amp(100 mg/ml),制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培養(yǎng)基。當DNA片段插入至pUC系列載體(或其他帶有l(wèi)acZ、Amp基因載體),然后轉化至lacZ缺失細胞中后,涂布上述的X–Gal、IPTG、Amp平板培養(yǎng)基,可根據長出菌體的藍白色,而方便地挑選出基因重組 體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)。

  IPTG-X-gal 平板制備的過程

  一、IPTG儲液配置:一般將IPTG配成20%(m/V)(約0.84M)的母液。稱取0.5克 IPTG粉末,用2 ml蒸餾水將其*溶解后,補加蒸餾水至2.5ml,用孔徑0.22 μm的小型注射型過濾器 (預先裝好濾膜滅菌備用)過濾除菌,-20 ℃凍存。

  二、X-gal儲液配置:用二甲基甲酰胺溶解X-gal配制成的20mg/ml的貯存液。稱取0.2克X-gal,加入10ml二甲基甲酰胺(DMF),溶解后保存于一小血清瓶內,裝有X-gal溶液的血清瓶須用鋁箔封裹以防因受光照而被破壞,并應貯存于-20℃。X-gal溶液無須過濾除菌。

  三、IPTG-X-gal平板制備:在含氨芐或卡那抗生素平板上,滴加40 µL的X-gal儲液及5 µL的IPTG儲液(怕體積過小影響涂布均勻,可適當稀釋后再涂布),涂布均勻后晾干后使用。在臨使用前提前1h制備。

  為方便實驗操作,試驗中也可以將X-gal和IPTG的儲備液按照菌液體積和平板數量計算好濃度,直接加入到準備用于涂平板的細菌培養(yǎng)液中,混勻后即可涂平板,這樣可以節(jié)省試驗時間。若經過培養(yǎng)后長出的菌落藍白斑顯示的不夠明顯,可以將平板放入4度冰箱里,過一段時間以后菌落的藍白斑就顯示的比較清晰了。

  X-Gal的注意事項:

  培養(yǎng)噬菌體時,Top agar中的添加量為:50 μl/3 ml(20mg/ml)。含有X-Gal的培養(yǎng)基4℃避光保存,須在1~2周內使用。

  • © 2019 上海懋康生物科技有限公司 版權所有 技術支持:環(huán)保在線
  • 電 話:18616957973 傳 真:86-021-54736159 QQ號碼:1563822900 郵 箱:2971634497@qq.com 地 址:上海市閔行區(qū)虹梅南路2588號綠亮科創(chuàng)園1幢A棟321室
  • 備案號:滬ICP備16016464號-3 總訪問量:630817
在線客服 聯(lián)系方式

服務熱線

18616957973

97精品国产亚洲av高清| 美国секс| 14表妺好紧没带套经过| 五月丁香综合缴情六月小说| 国产一级片毛片| 国产日韩欧美日日骚一区| 国产成人高清亚洲一区 | 亚洲欧洲成A∨在线观看| 久久9999久久免费精品国产| 亚洲综合精品第一页| 狠狠躁天天躁日日躁欧美| 青青草原综合久久大伊人精品| 粉嫩被两个粗黑疯狂进出| 密臀视频| 亚洲性夜| 亚洲精品一区二区三区在线观看| 玖玖热麻豆国产精品图片| 亚洲熟妇无码一区二区三区| 久久天天插天天舔天天日| 久久无码一区二区爽爽爽| 国产精品久久久久久久久齐齐| 欧美xxxbbb在线观看| 国产精品伦一区二区三级视频| 超碰精品99久久久久久| 中国精品va免费黄色大片| 亚洲av熟女五十路中出| 亚洲人成色777777精品音频| 亚洲国产精品一区二区久久| 成人国产一区二区三区精品| 日韩精品中文字幕国产精品| 亚洲精品午夜无码专区| 日韩的一区二区区别是什么| 麻豆国产精品va在线观看不卡| 国产高清熟女在线视频播放| 日本高清视频不卡一区二区 | 玩弄放荡人妻少妇200系列视频| 国产精品亚洲lv粉色| 国产免费午夜福利757| 窃听风云2手机在线观看| 国产chinese中国hdxxxx| 欧洲熟妇色|